El agar chocolate es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo que se utiliza ampliamente en microbiología para el aislamiento y cultivo de una amplia gama de bacterias, especialmente las que requieren factores de crecimiento adicionales, como las bacterias fastidiosas. Su nombre proviene del color marrón oscuro que adquiere debido a la hemólisis de los glóbulos rojos, lo que libera nutrientes esenciales para el crecimiento bacteriano.
Preparación del Agar Chocolate
La preparación del agar chocolate implica la lisis de los glóbulos rojos en un medio de agar sangre. La lisis se puede lograr mediante calentamiento a 80°C o mediante la adición de un agente hemolítico, como el cloruro de sodio. Este proceso libera hemoglobina y otros factores de crecimiento, como el NAD y el hemina, que son esenciales para el crecimiento de algunas bacterias.
Ingredientes:
- Agar nutritivo
- Sangre de cordero o caballo desfibrinada (5-10%)
- Cloruro de sodio (opcional)
Procedimiento:
- Preparar el agar nutritivo según las instrucciones del fabricante.
- Enfriar el agar nutritivo a 80°C.
- Añadir la sangre desfibrinada lentamente, mezclando suavemente para evitar la formación de espuma.
- Si se utiliza, añadir el cloruro de sodio al 0.5%.
- Verter el medio en placas de Petri estériles y dejar solidificar.
El agar chocolate debe almacenarse a 4°C y utilizarse dentro de las 24 horas de su preparación.
Bacterias que Crecen en Agar Chocolate
El agar chocolate es un medio de cultivo enriquecido que puede soportar el crecimiento de una amplia variedad de bacterias, incluyendo:
- Neisseria gonorrhoeae
- Neisseria meningitidis
- Haemophilus influenzae
- Streptococcus pneumoniae
- Moraxella catarrhalis
- Campylobacter jejuni
- Vibrio cholerae
- Brucella spp.
- Legionella pneumophila
Es especialmente útil para cultivar bacterias que requieren factores de crecimiento adicionales, como el NAD y la hemina, que son liberados por la hemólisis de los glóbulos rojos.
Diferencia entre Agar Sangre y Agar Chocolate
El agar chocolate y el agar sangre son medios de cultivo enriquecidos que utilizan sangre como base. Sin embargo, existen algunas diferencias clave entre ellos:
| Característica | Agar Sangre | Agar Chocolate |
|---|---|---|
| Hemólisis | No hay hemólisis | Hemólisis completa |
| Factores de crecimiento | Menos factores de crecimiento disponibles | Más factores de crecimiento disponibles |
| Utilización | Cultivo de una gama más amplia de bacterias, incluida la identificación de patrones de hemólisis | Cultivo de bacterias fastidiosas que requieren factores de crecimiento adicionales |
El agar sangre se utiliza para cultivar una gama más amplia de bacterias, incluida la identificación de patrones de hemólisis. El agar chocolate es más adecuado para cultivar bacterias que requieren factores de crecimiento adicionales liberados por la hemólisis completa, como el NAD y la hemina.
Qué puede Crecer en Agar Chocolate: Más allá de las Bacterias
Si bien el agar chocolate se utiliza principalmente para el cultivo de bacterias, también puede soportar el crecimiento de otros microorganismos, como:
- Hongos : algunos hongos pueden crecer en agar chocolate , aunque no es el medio de cultivo ideal para ellos.
- Levaduras : algunas levaduras también pueden crecer en agar chocolate , pero pueden ser difíciles de identificar en este medio.
Para un cultivo más específico de hongos y levaduras, se recomiendan medios de cultivo especializados. Por ejemplo, el R2A Agar se utiliza para el recuento de microorganismos heterótrofos en aguas tratadas y es un medio recomendado por el Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater y por la Farmacopea Europea 6º Edición.
El agar chocolate es un medio de cultivo esencial en microbiología, especialmente para el cultivo de bacterias fastidiosas que requieren factores de crecimiento adicionales. Su capacidad para proporcionar un entorno enriquecido lo convierte en una herramienta invaluable para el diagnóstico y la investigación microbiológica.
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